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n.BA.BT.PrZB2TE.23HS (Praktikum Zellbiologie 2 und Tissue Engineering)
Modul: Praktikum Zellbiologie 2 und Tissue Engineering
Diese Information wurde generiert am: 23.11.2024
Nr.
n.BA.BT.PrZB2TE.23HS
Bezeichnung
Praktikum Zellbiologie 2 und Tissue Engineering
Credits
3
Beschreibung
Version: 1.0 gültig ab 01.08.2023
Studiengang
Biotechnologie
Geltende Rechtsordnung
RPO vom 29. Januar 2008, Studienordnung des Dept. N vom 15. Dez. 2009, Anhang für den Bachelorstudiengang Biotechnologie
Modultyp
X
Pflichtmodul
Wahlpflichtmodul
Wahlmodul
Plansemester
5. Semester
Modulverantwortliche/r
Jack Rohrer
Telefon / E-Mail
+41 (0)58 934 57 17 /
jack.rohrer@zhaw.ch
Beteiligte Mitarbeitende und Lehrbeauftragte
Jack Rohrer, Leopold von Balthazar, Arezoo Daryadel
Vorausgesetzte Module
Zellbiologie 2, Praktikum Zellbiologie und Zellkulturtechnik 1
Zu erreichende Kompetenzen
Die Studierenden erwerben die Fähigkeit, die grundlegenden Arbeitstechniken zur Etablierung, Erhaltung und Vermehrung von Zell- und Gewebekulturen selbständig zu planen und durchzuführen. Neben der aseptischen Arbeitsweise wird auf die Einhaltung der Good Laboratory Practice geachtet.
Inhalt des Moduls
6 komplexe Experimente:
Anlegen einer Primärkultur: Das Ziel ist es, mittels Explantaten aus einer Schweineniere einzelne Zellen zu isolieren, diese in unterschiedlich gecoateten Wells wachsen zu lassen und nach einigen Tagen zu beobachten, welches Coating am meisten bzw. welche spezifische Art von Zellen isoliert werden konnten
Entzündungssimulation: Mit LPS wird in den Zellen eine Entzündungsreaktion (Zelle reagiert mit Ausschüttung von versch. Zytokinen) ausgelöst, welche mit unterschiedlichen Substanzen in verschiedenen Konzentrationen gehemmt werden soll. Der Nachweis erfolgt über einen Sandwich-ELISA, bei welchem die Konzentrationen (in ng/ml!) der Zytokine gemessen werden.
Zytotoxizität: Verschiedene Stoffe mit unterschiedlichen Konzentrationen werden auf ihren toxischen Einfluss auf HeLa- oder MDCK-Zellen nach 24 h untersucht. Dabei wird die Umsetzung der MTT-Substanz in den Mitochondrien der lebenden Zellen gemessen und es kann eine Dosis-Wirkungs-Kurve aufgezeichnet werden. Mit diesen Daten kann man anschliessend den IC50-Wert bestimmen.
3-D Kultivierung – „Hanging Drops“: In hängenden Tropfen (hanging Drops) züchtet man multizelluläre
Sphäroide
, welche als
in-vitro
Modell Minimetastasen und Bereiche solider Tumoren
in vivo
imitieren. Nach dem heiklen Transfer der Sphäroide auf beschichtete und unbeschichtete Vertiefungen einer Well Platte wird nach zwei Tagen die Grösse und Struktur der Zellen unter dem Mikroskop betrachtet und verglichen.
Fluoreszenz Immunostaining: Mehrere intrazelluläre Strukturen (Mikrotubuli, DNA und Golgi-Apparat) der HeLa-Zellen werden durch indirekte Immunofluoreszenz (IF), Direktfärbung mit einem Fluoreszenzfarbstoff oder Expression eines fluoreszierenden Proteins gefärbt und unter dem konfokalen Laser Mikroskop betrachtet. Dabei sollen möglichst viele unterschiedliche Stadien der Mitose erkannt werden. Zusätzlich wird getestet, wie sich die Zugabe von Nocodazol auf die gefärbten Zellbestandteile und die Mitose auswirkt.
Zelldifferenzierung: RANKL (Receptor Activator of NF-κB Ligand) induziert bei RAW-Zellen die Differenzierung zu Osteoklasten. Die morphologischen Auswirkungen auf die Zellen und die Differenzierungsrate sollen mikroskopisch beurteilt werden. Zusätzlich wird die Aktivität der Osteoklasten bestimmt, indem TRAP (Tartrate-resistant acidic phosphatase) im Medium der Kulturen nachgewiesen wird.
Anschlussmodule
Keine
Unterrichtsmethoden
Praktikum, Selbststudium
Digitale Lernressourcen
Lernvideos
Unterrichtsgliederung / Gesamtaufwand
Kontaktstudium
52
Begleitetes Selbststudium
6
Autonomes Selbststudium
32
Total Workload
90
Präsenzverpflichtung im Unterricht
-
Leistungsnachweise
Erfahrungsnote (Praktikumsbericht) 100%: Es wird in 2er Gruppen gearbeitet, es wird Bericht pro Gruppe abgegeben und bewertet
Unterrichtssprache
Deutsch
Bemerkungen
-
Kurs: Praktikum Zellbiologie 2 und Tissue Engineering
Nr.
n.BA.BT.PrZB2TE.23HS.P
Bezeichnung
Praktikum Zellbiologie 2 und Tissue Engineering
Hinweis
Für das Stichdatum 23.11.2024 ist kein Modulbeschreibungstext im System verfügbar.